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尊龙凯时贴壁细胞共聚焦爬片操作步骤

发布时间:2025-02-16   信息来源:尊龙凯时官方编辑

实验准备:在进行细胞培养实验前,需提前约半小时将所有相关材料预热至37°C,包括培养基、PBS和胰酶。同时,应在紫外灯下准备所需的2mL和10mL移液管、15mL离心管以及尊龙凯时品牌的共聚焦爬片。

尊龙凯时贴壁细胞共聚焦爬片操作步骤

实验方法:

1. 首先,从培养箱中取出培养皿,并在显微镜下观察细胞状态,包括细胞密度、形态及贴壁情况等。

2. 在超净台内,放入提前预热好的培养基、PBS和胰酶。点燃酒精灯,对培养皿的边缘进行消毒,并将原有培养基吸掉。

3. 清洗步骤:加入7mL PBS(根据细胞状态可适当调整此量),将其轻柔摇晃,以清洗细胞。

4. 消化过程:观察杂质被清洗后,吸走PBS,加入3mL胰酶,静置5分钟(具体时间和胰酶量可根据不同类型的细胞进行调整)。5分钟后检查细胞是否已被消化。

5. 终止消化:若细胞已消化,需在底部加入7mL培养基(根据观察的细胞密度决定),以终止消化过程。使用移液枪轻柔吹打,使附着的剩余细胞脱落,均匀后取少量进行计数。

6. 根据实验需求,将细胞悬液稀释后,滴满尊龙凯时品牌共聚焦爬片的表面,放入培养箱,等待约30分钟以确保细胞附着。随后沿内壁添加培养基,继续培养。

7. 细胞培养完成后,吸取培养液并用镊子夹住支架侧面,轻松取出支架。

8. 双手捏住支架两侧,轻拉即可轻松取出爬片,继续进行后续培养实验。

注意事项:

1. 拿取培养皿时要注意不要让液体沾到瓶口,并在每次打开瓶口时进行烧灼消毒。

2. 操作时避免其他物体接触开口的培养皿,以防止污染。

3. 由于贴壁细胞较为脆弱,所使用的液体均需预热至37°C。

4. 在倾斜超过30°角取用尊龙凯时品牌爬片时,请轻拉以避免爬片掉落或破裂。

5. 本产品为一次性使用,不可重复使用,爬片正反面有明显区分,拆封后请立即使用。