尊龙凯时的Millipore超滤管因其卓越的设计,迅速成为生物样品操作领域的标杆产品。然而,近90%的用户在选择和使用时遇到了困难。今天,我们就来学习如何科学地使用它们。
Millipore超滤管概述
Millipore品牌下的Amicon®Ultra离心式超滤管是生物样品处理的行业标准,适用于蛋白质、核酸、病毒及颗粒物的浓缩和纯化。它的设计具备高回收率、简便操作及标准化流程的特性,能够满足下游不同实验的需求,特别适合处理低浓度或高活性样品。
Millipore超滤管核心选择原则
1. 截留分子量(NMWL)定义及标准
Millipore超滤管采用再生纤维素膜,截留分子量的定义是:所选膜对特定大小的球形分子的截留率≥90%。例如,100kDa的膜可以截留90%以上的100kDa球形蛋白。
2. 选择策略
原则一:膜孔径需小于目标分子。
原则二:如果目标分子接近球形结构(而非线性分子),建议选择截留分子量等于或略小于目标分子量。例如,120kDa蛋白推荐选用100kDa膜(而非更低),以实现回收率与操作效率的平衡。
误区提示:选择过小的膜孔径(如用30kDa膜处理120kDa蛋白)会导致流速显著降低,增加离心时间并提高样品损伤的风险。具体型号(如AU05/4/15)的离心参数应参考官方说明书。
Millipore超滤管型号选择与操作优化
1. 型号匹配
根据起始样品体积(如05/2/4/15/70mL)、目标分子量及浓缩倍数选择相应规格。例如:AU05适用于微量样品(起始体积为05mL),而AU70则适合大体积样本(70mL)的高效浓缩。
2. 倒转离心回收技术
关键步骤:浓缩完成后,将超滤管倒置离心(短时间低转速),使样品从膜表面脱离,以实现最大化的回收率(>95%)。适用型号包括AU05、AU2、AU70,均支持反转回收设计。特别地,AU05配备双外管,便于倒转离心操作。
Millipore超滤管常见问题解答
Q:如何避免样品残留?
A:优先选择倒转离心法(选项C),而非枪头吸取(选项A/B),以减少吸附损失。
Q:为何流速过慢?
A:检查是否误选过小的截留分子量,或样本中含有高粘度或杂质成分。
总结
在选择尊龙凯时的Millipore超滤管时,应综合考虑目标分子量、样品体积及操作方式。遵循截留分子量选择原则并利用倒转离心技术,可以显著提升回收效率并缩短实验时间。
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