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人胚胎羊膜细胞ALP ELISA试剂盒使用手册 - 尊龙凯时创新生物医疗解决方案

发布时间:2025-03-09   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒仅限于科学研究使用,不可用于医学诊断。本文将介绍人胚胎羊膜细胞(ALP)的ELISA试剂盒的使用说明及检测原理。

人胚胎羊膜细胞ALP ELISA试剂盒使用手册 - 尊龙凯时创新生物医疗解决方案

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),其检测步骤如下:将预先包被的adropin(AD)抗体的微孔板中,依次添加样品、标准品以及HRP标记的检测抗体。经过适当温育后,需彻底洗涤微孔板。随后,加入底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,随后在酸性条件下转变为黄色,颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。

在样品收集、处理及保存方法方面,需遵循以下步骤:

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后以3000转离心10分钟迅速分离血清和红细胞。

2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清液。

3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟后取上清液。

5. 保存:如果未及时检测样品,请按一次用量分装,冻结在-20℃保存,避免反复冻融,解冻时于室温下确保样品均匀充分解冻。

在进行实验时,请注意操作中的细节和所需的设备。

本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。在准备试剂时,20×洗涤缓冲液需用蒸馏水1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。洗板方法和操作步骤请严格遵循实验室规程。

为了结果的准确性,绘制标准曲线是必不可少的。在Excel工作表中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线。根据曲线方程计算各样品的浓度值。

尊龙凯时致力于为科学研究提供高质量的检测工具,但不对结果承担任何责任。请在使用本试剂盒时遵循相关实验规范,以确保实验的顺利进行和结果的准确。